TB-500 et thymosine β4 : fragment ou peptide complet ?
Le TB-500 n’est pas la thymosine β4 : heptapeptide acétylé de 889 Da contre 43 résidus et 4 963 Da. Séquences, différences analytiques et Ac-SDKP.
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« TB-500 » et « thymosine β4 » sont souvent employés comme synonymes. Ce n’est pas le cas. Le premier est un fragment court, le second la protéine complète de 43 acides aminés. Pour un chercheur, la différence est fondamentale : on ne compare pas des résultats obtenus avec l’un et avec l’autre.
La thymosine β4
La thymosine β4 (Tβ4) est un peptide de 43 résidus, acétylé sur sa sérine N-terminale :
Ac-SDKPDMAEIEKFDKSKLKKTETQEKNPLPSKETIEQEKQAGES
| Propriété | Valeur |
|---|---|
| Formule brute | C212H350N56O78S |
| Masse molaire moyenne | 4 963,5 g/mol |
| Numéro CAS | 77591-33-4 |
| Point isoélectrique | ≈ 5 (riche en Glu et Asp) |
C’est l’un des principaux peptides de séquestration de l’actine monomérique (G-actine) dans les cellules, ce qui en fait un outil classique des études du cytosquelette. Sa synthèse chimique est délicate : 43 couplages successifs, avec un rendement qui chute à chaque étape (voir synthèse en phase solide).
Le TB-500
Le peptide vendu sous le nom TB-500 est l’heptapeptide acétylé :
Ac-Leu-Lys-Lys-Thr-Glu-Thr-Gln (Ac-LKKTETQ)
Il correspond aux résidus 17 à 23 de la Tβ4, une région décrite comme le site de liaison à l’actine. Sa formule est C38H68N10O14 pour une masse de 889,0 g/mol, soit plus de cinq fois moins que la protéine complète.
Comment les distinguer au laboratoire
La spectrométrie de masse tranche immédiatement : 889 Da contre 4 963 Da. En HPLC, la Tβ4 sort plus tard et nécessite souvent une colonne à pores larges (300 Å) adaptée aux peptides longs. Un rapport « TB-500 » montrant une masse proche de 4 963 Da décrit en réalité de la Tβ4, et inversement.
| TB-500 | Thymosine β4 | |
|---|---|---|
| Longueur | 7 résidus | 43 résidus |
| Masse | 889,0 Da | 4 963,5 Da |
| Ions ESI typiques | [M+H]⁺, [M+2H]²⁺ | [M+5H]⁵⁺ à [M+8H]⁸⁺ |
| Méthionine | Non | Oui (Met6, sensible à l’oxydation) |
| Coût de synthèse | Faible | Élevé |
L’Ac-SDKP : l’autre extrémité
Les quatre premiers résidus de la Tβ4, Ac-Ser-Asp-Lys-Pro, forment un tétrapeptide distinct, l’Ac-SDKP (goralatide). Il est libéré in vitro par la prolyl-oligopeptidase et sert de substrat de référence pour cette enzyme. Avec la Tβ4 complète et le TB-500, il permet de comparer la protéine entière et deux de ses fragments dans un même plan d’expérience.
Stabilité
Le TB-500 est court, sans résidu oxydable, et se conserve bien lyophilisé. La Tβ4 contient une méthionine en position 6, qui s’oxyde en sulfoxyde (+16 Da) au contact de l’air en solution ; préparez ses solutions juste avant usage et conservez la poudre à −20 °C (voir Oxydation de la méthionine).
Formats
- TB-500 : 5, 10 et 20 mg, et en mélange avec le BPC-157 (BPC-157 + TB-500).
- Thymosine β4 complète : 5 et 10 mg.
- Ac-SDKP : 10 mg.
Tous trois appartiennent à la famille BPC-157 et TB-500.
